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產(chǎn)品名稱:M1070 D2000 plus DNA Ladder

產(chǎn)品型號:M1070

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:M1070 D2000 plus DNA Ladder
D2000 plus DNA Ladder是由單獨制備的PCR產(chǎn)物混合而成,共有9條DNA段,已加入上樣緩沖液,可以直接電泳,每次上樣5μl。

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M1070M1070 D2000 plus DNA Ladder的詳細(xì)資料:

M1070 D2000 plus DNA Ladder

 

儲存條件-20℃,有效期1年
外觀(性狀)液體
單位

M1070 D2000 plus DNA Ladder是由單獨制備的PCR產(chǎn)物混合而成,共有9條DNA段,已加入上樣緩沖液,可以直接電泳,每次上樣5μl。為便于電泳后觀察,特異性加強(qiáng)750bp條帶,其濃度約為100ng/5μl,其它條帶的DNA濃度約為50ng/5μl。

參考片段(bp):100、250、500、750、1000、1500、2000、3000、5000

 

質(zhì)粒是細(xì)胞內(nèi)的一種環(huán)狀的小分子DNA,是DNA重組的常用載體,在DNA重組中,質(zhì)?;蚪?jīng)過改造后的質(zhì)粒載體可通過連接外源基因構(gòu)成重組體。在質(zhì)粒提取過程中,多數(shù)質(zhì)粒粗提取物中含有三種構(gòu)型的質(zhì)粒:共價閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)、質(zhì)粒的兩條鏈沒有斷裂、超螺旋開環(huán)DNA(ocDNA)、質(zhì)粒的一條鏈斷裂、松弛的環(huán)狀分子線形DNA(lDNA):質(zhì)粒的兩條鏈均斷裂;線性分子質(zhì)粒DNA的分子構(gòu)型。

 

質(zhì)粒小量提取的方法

1.將3~5ml菌液13,000rpm離心30秒收集沉淀(菌體)。 如果用1.5ml或2ml離心管則需反復(fù)離心2~3次。

2.倒掉上清,將沉淀(菌體)*懸浮于100μl懸 浮液(溶液I)中。上清要盡可能去除干凈,可用濾紙吸干。沉淀要 用混旋器*懸浮,否則將直接導(dǎo)致下一步的裂 解不*,進(jìn)而影響質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和純度。

3.加入150μl裂解液(溶液II),輕柔地顛倒混勻10 次左右,溶液逐漸變得粘稠、清亮。不可用混旋器劇烈振蕩,否則會使質(zhì)粒DNA斷裂; 裂解時間不宜超過5分鐘,否則會造成染色體DNA 的污染及質(zhì)粒DNA的產(chǎn)率降低。

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