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產(chǎn)品名稱:谷胱甘肽還原酶(GR)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC1160

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):谷胱甘肽還原酶(GR)活性檢測試劑盒
測定意義:GR 是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一(通常昆蟲中 GR 被 TrxR 取代)。

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BC1160谷胱甘肽還原酶(GR)活性檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

 

產(chǎn)品名稱:谷胱甘肽還原酶(GR)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名 Glutathion Reductases(GR) Assay Kit

產(chǎn)品貨號:BC1160          產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣            產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價(jià)格:240
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:谷胱甘肽還原試劑盒|活性檢測試劑盒|GR活性檢測|試劑盒|

簡要介紹:
GR 是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一(通常昆蟲中 GR 被 TrxR 取代)。GR 催化NADPH 還原 GSSG 生成 GSH,有助于維持體內(nèi)GSH/GSSG比值。GR 在氧化脅迫反應(yīng)中對活性氧清除起關(guān)鍵作用,此外 GR還參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)途徑。
    GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH,同時(shí)不斷消耗NADPH生成NADP+;NADPH在340nm有特征吸收峰,相反NADP+在該波長無吸收峰;通過測定340nm吸光度下降速率;來測定NADPH脫氫速率,從而計(jì)算GR活性。



產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容
試劑一:液體100mL×1瓶,4保存。
試劑二:液體3mL×1瓶,4保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4保存。臨用前加入5.0 mL蒸餾水,混勻。
產(chǎn)品說明
GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,GR催化GSSG還原生成GSH,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一(通常昆蟲中GRTrxR取代)。GR催化NADPH還原GSSG生成GSH,有助于維持體內(nèi)GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應(yīng)中對活性氧清除起關(guān)鍵作用,此外GR還參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)途徑。
GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH,同時(shí)NADPH脫氫生成NADP+NADPH340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在該波長無吸收峰;通過測定340 nm吸光度下降速率來測定NADPH脫氫速率,從而計(jì)算GR活性。
自備儀器和用品:
紫外-可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水
操作步驟:
一、粗酶液提?。?/span>
稱約0.1g組織,加入1.0 ml試劑一,冰上充分研磨,10000rpm 4離心10min,取上清液,待測。
二、GR測定操作:
1. 紫外-可見分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑一置于25(普通物質(zhì))或者37(哺乳動(dòng)物)中預(yù)熱30min以上。
3. 空白管:取1mL石英比色皿,加入50μL試劑二,100μL試劑三,850μL試劑一,于340nm測定10 s190 s吸光度,記為A1A2
4. 測定管:取1mL石英比色皿,加入50μL試劑二,100μL試劑三,100μL上清液,750μL試劑一,于340nm測定10 s190 s吸光度,記為A1A2
注:樣品測定10s時(shí)吸光度后,將比色皿放入25(普通物質(zhì))或者37(哺乳動(dòng)物)水浴,3min后拿出,吸打混勻,立即測定190s時(shí)的吸光度。
三、GR活性計(jì)算:
1)按蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義:在一定溫度中,pH8.0條件下,每毫克蛋白每分鐘催化1μmol NADPH氧化為一個(gè)酶活力單位。
GR酶活(U/mg prot)= [ (A測定管-A空白管)÷ε÷d×V反總×106] ÷[Cpr×V]÷T
                     =0.536×(A測定管-A空白管)÷Cpr
2)按樣本鮮重計(jì)算
活性單位定義:在一定溫度中,pH8.0條件下,每克樣品每分鐘催化1μmol NADPH氧化為一個(gè)酶活力單位。
GR酶活(U/g 鮮重)= [ (A測定管-A空白管)÷(ε×d)×V反總×106] ÷(V÷V樣總×W)÷T
                =0.536×(A測定管-A空白管)÷W
A空白管=A1-A2,△A測定管=A1-A2εNADPH摩爾消光系數(shù)6.22×103L/mol/cm;V反總:反應(yīng)體系總體積,1000μL=0.001 L;1061 mol=1×106μmol;Cpr:上清液蛋白濃度(mg/mL);V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,100μL =0.1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,3 min;W:樣本鮮重,g。
注意事項(xiàng):
1)樣品處理等過程均需要在冰上進(jìn)行,且須在當(dāng)日測定酶活力,勻漿液避免反復(fù)凍融;
2)試劑三須現(xiàn)配現(xiàn)用,配置完后,置于冰上;
3)測定前須先用12個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),確保180s內(nèi)吸光值變化呈線性,哺乳動(dòng)物組織一般須用試劑一稀釋25倍;
4)細(xì)胞中GR活性測定時(shí),細(xì)胞數(shù)目須在300-500萬之間,細(xì)胞中GR的提取時(shí)可加試劑一后研磨或超聲波處理,不能用細(xì)胞裂解液處理細(xì)胞。

相關(guān)文獻(xiàn):
《Composition Analysis by UPLC-PDA-ESI (?)-HRMS and Antioxidant Activity Using Saccharomyces cerevisiae Model of Herbal Teas and Green Teas from Hainan》 作者: Hua Li, Lanying Wang and Yanping Luo 期刊:molecules 影響因子:3.06 PMID:30301226
《A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice》 作者:ZeyongZhangaHuanhuanLiuaCeSunbQibinMaaHuaiyuBubKangChongaYunyuanXu 期刊:Journal of Plant Physiology 影響因子:2.825 PMID:30055519
《Geobacter sulfurreducens-inoculated bioelectrochemical system reveals the potential of metabolic current in defining the effect of extremely low-frequency electromagnetic field on living cells.》 作者:ZhenhuaShi 期刊:Ecotoxicol. Environ. Saf. 影響因子:4.527 PMID:30743077
 

谷胱甘肽還原酶(GR)活性檢測試劑盒

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